脂氧合酶(LOX)活性測定試劑盒
微量法100T/48S
注意:正式測定之前選擇2-3個預(yù)期差異大的樣本做預(yù)測定。
測定意義:
LOX廣泛存在于動植物組織中,催化不飽和脂肪酸氧化反應(yīng),導(dǎo)致膜脂過氧化。在生物體的生長發(fā)育、成熟衰老及逆境脅迫過程中具有重要作用。
測定原理:
LOX催化亞油酸氧化,氧化產(chǎn)物在280nm處有特征吸收峰;測定280nm吸光度增加速率,來計算LOX活性。
自備儀器和用品:
研缽、冰、臺式離心機、紫外分光光度計/酶標(biāo)儀、微量石英比色皿/96孔板(UV板)、可調(diào)式移液槍和蒸餾水。
分類要點:
1. 酶活性檢測:基于酶催化底物生成產(chǎn)物的速率定量;
2. 代謝物檢測:通過特異性反應(yīng)顯色定量;
3. 免疫類(ELISA):雙抗體夾心法形成三明治結(jié)構(gòu)顯色。
適用:動植物組織、微生物等樣本精準(zhǔn)檢測。
試劑組成
注:部分試劑盒還包含酶標(biāo)板、比色杯等耗材
儲存與穩(wěn)定性(以說明書為準(zhǔn))
常規(guī)儲存:2-8℃冷藏,避免反復(fù)凍融
特殊要求:部分酶類或抗體試劑需-20℃冷凍保存
有效期:未開封通常12個月,開封后建議在規(guī)定時間內(nèi)用完
結(jié)果計算
按標(biāo)準(zhǔn)曲線計算:含量=(測定管吸光值-空白值)÷(標(biāo)準(zhǔn)管吸光值-空白值)×標(biāo)準(zhǔn)品濃度÷樣本量
所需儀器(自備)
分光光度計/酶標(biāo)儀、離心機、水浴鍋/金屬浴、移液器、反應(yīng)容器等
關(guān)鍵注意事項
試劑使用前充分混勻,按要求儲存,避免反復(fù)凍融
嚴(yán)格控制反應(yīng)溫度和時間,確保操作規(guī)范
樣本需新鮮,避免溶血、污染,采集后及時檢測
操作時佩戴防護用品,廢液按規(guī)范處理