中性蛋白酶（Neutral protease, NP）活性測(cè)定試劑盒

微量法 100T/48S

注意：正式測(cè)定之前選擇2-3個(gè)預(yù)期差異大的樣本做預(yù)測(cè)定。

測(cè)定意義：

NP在一定的溫度和中性pH條件下，催化水解蛋白質(zhì)。由于其安全無毒、水解能力強(qiáng)、作用范圍廣等特點(diǎn)，中性蛋白酶常用于食品、飼料、化妝品和營養(yǎng)保健品生產(chǎn)。

測(cè)定原理：

中性條件下，NP催化酪蛋白水解產(chǎn)生酪氨酸；在堿性條件下，酪氨酸還原磷鉬酸化合物生成鎢藍(lán)；在680nm有特征吸收峰。

自備儀器和用品：

可見分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、微量玻璃比色皿/96孔板、水浴鍋、磁力攪拌器、可調(diào)式移液槍、1.5 mL EP管和蒸餾水。

試劑盒的組成

基礎(chǔ)試劑：通常為試劑 1（R1）、試劑 2（R2），部分試劑盒可能含試劑 3（R3）等，主要成分包括緩沖液、酶、底物、輔助因子等，需標(biāo)注各組分的裝量（mL / 瓶）或可測(cè)試數(shù)量。

配套校準(zhǔn) / 質(zhì)控組分（如適用）：校準(zhǔn)品：含被測(cè)物標(biāo)準(zhǔn)品，搭配特定基質(zhì)（如人血清、BSA 等），提供明確靶值，且定值需溯源至國際 / 國家標(biāo)準(zhǔn)品；

質(zhì)控品：含不同濃度（高 / 中 / 低）被測(cè)物，用于驗(yàn)證檢測(cè)結(jié)果準(zhǔn)確性，靶值范圍為批特異；

配套耗材（如適用）：如塑料滴管、封板膜等，標(biāo)注具體數(shù)量。

注：不同批號(hào)試劑盒的各組分不得混用；校準(zhǔn)品、質(zhì)控品的賦值僅適用于本批號(hào)試劑盒。

測(cè)定步驟

生化試劑盒的核心分類

按檢測(cè)原理和目標(biāo)物類型，可分為以下幾大類，覆蓋多數(shù)實(shí)驗(yàn)場(chǎng)景：

1. 代謝物檢測(cè)試劑盒用于檢測(cè)血糖、甘油三酯（TG）、膽固醇（TC）、尿酸、乳酸、丙酮酸等小分子代謝物，原理多為終點(diǎn)比色法 / 速率比色法。例如血糖試劑盒通過葡萄糖氧化酶（GOD）- 過氧化物酶（POD）偶聯(lián)反應(yīng)，生成有色物質(zhì)，吸光度與葡萄糖濃度正相關(guān)。

2. 酶活性檢測(cè)試劑盒適用于 SOD、CAT、POD、LDH、ALT、AST 等酶活性測(cè)定，以速率法為主。通過監(jiān)測(cè)酶促反應(yīng)過程中底物或產(chǎn)物的吸光度變化速率，計(jì)算酶活性單位（U）。比如 SOD 試劑盒利用氮藍(lán)四唑（NBT）光還原法，SOD 抑制 NBT 還原的程度與酶活性相關(guān)。

3. 蛋白定量試劑盒包括 BCA、Bradford、Lowry 法試劑盒，其中微量 BCA 試劑盒適合樣本量少的場(chǎng)景。BCA 法基于堿性條件下蛋白與 Cu2?結(jié)合，還原 BCA 試劑生成紫色復(fù)合物，在 562nm 處有特征吸收峰。

4. 離子檢測(cè)試劑盒用于檢測(cè)鈣、磷、鉀、鈉等無機(jī)離子，如鈣試劑盒通過鈣與偶氮砷 Ⅲ 結(jié)合生成有色絡(luò)合物，進(jìn)行比色定量。

相關(guān)產(chǎn)品：