注意:因業(yè)務(wù)調(diào)整,暫不接受個人委托測試,望諒解(高校、研究所等性質(zhì)的個人委托除外)。
因篇幅原因,CMA/CNAS/ISO證書以及未列出的項目/樣品,請咨詢在線工程師。
基質(zhì)金屬蛋白酶檢測
基質(zhì)金屬蛋白酶是一類依賴于鋅離子的內(nèi)肽酶家族,在細胞外基質(zhì)降解與重塑中扮演核心角色。其活性異常與腫瘤侵襲轉(zhuǎn)移、關(guān)節(jié)炎、心血管疾病等多種病理過程密切相關(guān)。專業(yè)檢測機構(gòu)通過精準分析特定基質(zhì)金屬蛋白酶的含量或活性,為疾病機制研究、藥物靶點篩選及臨床輔助診斷提供關(guān)鍵數(shù)據(jù)支撐。檢測要點在于樣本的規(guī)范處理以防止酶失活,并依據(jù)研究目標選擇針對性的蛋白酶亞型及高特異性的檢測方法,確保結(jié)果的準確性與可重復(fù)性。
檢測項目
1. 基質(zhì)金屬蛋白酶含量測定:MMP-1,MMP-2,MMP-3,MMP-7,MMP-8,MMP-9,MMP-10,MMP-12,MMP-13,MMP-14等不同亞型的蛋白濃度定量分析。
2. 基質(zhì)金屬蛋白酶活性檢測:通過熒光底物、明膠酶譜法等方法測定特定基質(zhì)金屬蛋白酶的催化活性,評估其功能狀態(tài)。
3. 組織金屬蛋白酶抑制劑測定:TIMP-1,TIMP-2,TIMP-3,TIMP-4等內(nèi)源性抑制劑的含量分析,評估酶活性的抑制調(diào)控水平。
4. 基質(zhì)金屬蛋白酶基因表達分析:通過逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)、實時熒光定量聚合酶鏈反應(yīng)等技術(shù)檢測特定基質(zhì)金屬蛋白酶信使核糖核酸的表達水平。
5. 酶原激活分析:檢測無活性的酶原形式向活性酶的轉(zhuǎn)化過程,研究酶的激活機制與調(diào)控。
6. 細胞侵襲與遷移實驗關(guān)聯(lián)分析:結(jié)合Transwell小室等細胞功能實驗,關(guān)聯(lián)分析基質(zhì)金屬蛋白酶活性與細胞侵襲遷移能力。
7. 組織定位與表達分析:采用免疫組織化學(xué)、免疫熒光等方法,在組織切片上對基質(zhì)金屬蛋白酶進行定位和半定量分析。
8. 復(fù)合物形成檢測:分析基質(zhì)金屬蛋白酶與其抑制劑或其他蛋白之間的相互作用與復(fù)合物形成。
9. 底物特異性分析:研究特定基質(zhì)金屬蛋白酶對不同天然或合成底物的水解效率與偏好性。
10. 激活劑與抑制劑篩選:評估不同化合物對基質(zhì)金屬蛋白酶活性或表達的促進或抑制效果。
檢測范圍
1. 臨床樣本:血清,血漿,全血,關(guān)節(jié)滑液,胸腔積液,腹水,腦脊液,尿液,唾液,組織勻漿液(如腫瘤、動脈粥樣硬化斑塊、軟骨組織等),病理切片樣本。
2. 細胞生物學(xué)樣本:各種貼壁或懸浮培養(yǎng)的細胞系,原代細胞,細胞培養(yǎng)上清液,細胞裂解液,細胞條件培養(yǎng)基。
3. 動物模型樣本:疾病模型動物(如腫瘤模型、關(guān)節(jié)炎模型、心肌梗死模型)的血液、組織、灌洗液等樣本。
4. 藥物研發(fā)樣本:候選藥物處理后的細胞或動物樣本,用于評估藥物對基質(zhì)金屬蛋白酶通路的影響。
5. 食品與保健品:具有潛在調(diào)節(jié)基質(zhì)金屬蛋白酶活性的功能性成分或提取物。
6. 化妝品原料:評估某些成分(如抗衰老、修復(fù)成分)對皮膚成纖維細胞等細胞基質(zhì)金屬蛋白酶表達的影響。
7. 生物材料:與細胞共培養(yǎng)后的生物材料浸提液,評估材料對細胞基質(zhì)金屬蛋白酶表達的影響。
檢測方法與標準
基質(zhì)金屬蛋白酶的檢測主要依據(jù)免疫學(xué)、酶學(xué)及分子生物學(xué)原理,遵循國內(nèi)外通用的技術(shù)標準與指南,以確保檢測的科學(xué)性與規(guī)范性。
常用檢測標準(標準號):GB/T 33410、GB/T 37866、WS/T 420、YY/T 1448、ISO 5725、CLSI EP05、CLSI EP06、CLSI EP07、CLSI EP17、藥典相關(guān)指導(dǎo)原則。
檢測設(shè)備
1. 酶標儀:用于酶聯(lián)免疫吸附試驗、比色法及熒光法檢測吸光度或熒光強度,是進行高通量基質(zhì)金屬蛋白酶含量與活性分析的核心設(shè)備。
2. 實時熒光定量聚合酶鏈反應(yīng)儀:用于高靈敏度、高特異性地定量檢測基質(zhì)金屬蛋白酶及相關(guān)基因的信使核糖核酸表達水平。
3. 蛋白電泳系統(tǒng):包括垂直電泳槽、電源及轉(zhuǎn)移裝置,用于明膠酶譜法分析基質(zhì)金屬蛋白酶活性,通過電泳分離和底物共孵育顯示酶解條帶。
4. 化學(xué)發(fā)光成像系統(tǒng)/凝膠成像系統(tǒng):用于采集并分析電泳凝膠、印跡膜上的化學(xué)發(fā)光或熒光信號,對明膠酶譜、免疫印跡結(jié)果進行定性和半定量分析。
5. 高效液相色譜儀:配備熒光或紫外檢測器,可用于分離和定量分析基質(zhì)金屬蛋白酶水解底物后產(chǎn)生的特定肽段,用于精確的酶動力學(xué)研究。
6. 質(zhì)譜儀:特別是液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜聯(lián)用儀,用于基質(zhì)金屬蛋白酶及其修飾、降解產(chǎn)物的高精度鑒定與絕對定量。
7. 流式細胞儀:用于檢測細胞表面表達的基質(zhì)金屬蛋白酶(如膜型基質(zhì)金屬蛋白酶),或結(jié)合細胞內(nèi)染色技術(shù)分析其表達。
8. 倒置熒光顯微鏡及共聚焦顯微鏡:用于細胞免疫熒光實驗,直觀觀察基質(zhì)金屬蛋白酶在細胞內(nèi)的定位、表達及分布情況。
9. 細胞功能分析設(shè)備:如Transwell小室、劃痕實驗用具、細胞實時追蹤分析系統(tǒng),用于關(guān)聯(lián)分析基質(zhì)金屬蛋白酶活性與細胞生物學(xué)行為。
10. 生物分子相互作用分析系統(tǒng):如表面等離子共振儀,用于實時、無標記地分析基質(zhì)金屬蛋白酶與抑制劑、抗體或底物之間的相互作用動力學(xué)。
檢測技術(shù)研究院
?? 報告:可出具第三方檢測報告(電子版/紙質(zhì)版)。
? 檢測周期:7~15工作日,可加急。
?? 資質(zhì):旗下實驗室可出具CMA/CNAS/ISO資質(zhì)報告。
?? 標準測試:嚴格按國標/行標/企標/國際標準檢測。
?? 非標測試:支持定制化試驗方案。