硫氧還蛋白過氧化物酶（Thioredoxin Peroxidase，簡(jiǎn)稱 TPX），又稱 peroxiredoxin（Prx），是一類廣泛存在于原核生物和真核生物中的抗氧化酶家族。與谷胱甘肽過氧化物酶（GSH-Px）依賴谷胱甘肽（GSH）作為電子供體不同，TPX 主要以硫氧還蛋白（Trx） 為電子供體，通過自身活性位點(diǎn)的半胱氨酸殘基（-SH）的氧化還原反應(yīng)，特異性清除體內(nèi)的活性氧（ROS），尤其是過氧化氫（H?O?）和有機(jī)過氧化物（如脂質(zhì)過氧化物），是生物體內(nèi)抗氧化防御系統(tǒng)的重要組成部分。

TPX 家族成員根據(jù)結(jié)構(gòu)特征和催化機(jī)制可分為不同亞型（如 Prx1-Prx6），但核心功能均圍繞 “清除過氧化物、維持細(xì)胞 redox 平衡” 展開，其活性調(diào)控與細(xì)胞氧化應(yīng)激水平、信號(hào)傳導(dǎo)及細(xì)胞凋亡等過程密切相關(guān)。

生理功能

TPX 作為關(guān)鍵的抗氧化酶，在生物體內(nèi)發(fā)揮多維度生理作用，涵蓋基礎(chǔ)抗氧化防御、細(xì)胞信號(hào)調(diào)控及病理保護(hù)等領(lǐng)域。

1. 清除活性氧（ROS），抵御氧化應(yīng)激損傷

這是 TPX 最核心的生理功能。細(xì)胞在代謝過程中會(huì)產(chǎn)生 H?O?、超氧陰離子（O???）等 ROS，過量 ROS 會(huì)攻擊脂質(zhì)、蛋白質(zhì)和 DNA，導(dǎo)致氧化損傷，引發(fā)衰老、炎癥及多種疾?。ㄈ绨┌Y、神經(jīng)退行性疾?。?。TPX 可通過 “氧化 - 還原循環(huán)” 高效清除 H?O?：首先，TPX 活性位點(diǎn)的半胱氨酸被 H?O?氧化為次磺酸（-SOH）；隨后，硫氧還蛋白（Trx）提供電子，將 TPX 還原為活性狀態(tài)，同時(shí) Trx 被氧化為二硫鍵形式（Trx-SS-）；最終，氧化型 Trx 再通過硫氧還蛋白還原酶（TrxR）和 NADPH 再生，完成整個(gè)抗氧化循環(huán)。該過程可快速降低細(xì)胞內(nèi) H?O?濃度，避免氧化應(yīng)激對(duì)細(xì)胞的損傷。

2. 調(diào)控細(xì)胞信號(hào)通路，參與細(xì)胞增殖與凋亡

H?O?不僅是 “有害的氧化產(chǎn)物”，也是重要的細(xì)胞內(nèi)信號(hào)分子，可通過氧化特定蛋白質(zhì)的半胱氨酸殘基，調(diào)控激酶、轉(zhuǎn)錄因子等信號(hào)分子的活性，進(jìn)而影響細(xì)胞增殖、分化和凋亡。TPX 可通過精準(zhǔn)調(diào)控局部 H?O?的濃度，參與這些信號(hào)通路的 “微調(diào)”：例如，在細(xì)胞增殖信號(hào)通路中，TPX 可適度清除 H?O?，避免其過量積累導(dǎo)致細(xì)胞周期停滯；而在凋亡信號(hào)激活時(shí)，TPX 活性可能被抑制，導(dǎo)致 H?O?水平升高，從而促進(jìn)凋亡相關(guān)蛋白的激活，維持細(xì)胞穩(wěn)態(tài)。

3. 保護(hù)細(xì)胞器，維持代謝穩(wěn)態(tài)

TPX 廣泛分布于細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)、線粒體、葉綠體（植物中）等部位，針對(duì)不同細(xì)胞器的 ROS 產(chǎn)生特點(diǎn)發(fā)揮保護(hù)作用：

4. 參與免疫反應(yīng)與炎癥調(diào)控

在免疫細(xì)胞（如巨噬細(xì)胞、中性粒細(xì)胞）中，TPX 可通過清除免疫激活過程中產(chǎn)生的過量 ROS，避免炎癥反應(yīng)過度激活；同時(shí)，TPX 自身也可作為 “損傷相關(guān)分子模式（DAMPs）”，在細(xì)胞損傷時(shí)釋放到胞外，激活免疫細(xì)胞，參與機(jī)體的抗感染和損傷修復(fù)過程。此外，TPX 還可通過調(diào)控炎癥相關(guān)信號(hào)通路（如 NF-κB 通路），抑制促炎因子（如 TNF-α、IL-6）的釋放，減輕炎癥損傷。

茁彩生物基于 TPX 和過氧化氫酶（CAT）對(duì) H?O?的特異性催化作用，開發(fā)了可同時(shí)測(cè)定兩種酶活性的試劑盒，核心原理利用 H?O?的光譜學(xué)特性，通過監(jiān)測(cè)特定波長(zhǎng)吸光度變化實(shí)現(xiàn)定量分析。

1. 核心測(cè)定原理

（1）H?O?的光譜學(xué)特征

過氧化氫（H?O?）在紫外光區(qū)的240nm 波長(zhǎng)處具有特異性吸收峰，其吸光度值與濃度呈線性正相關(guān)（符合朗伯 - 比爾定律）。當(dāng) H?O?被酶催化分解為 H?O 和 O?時(shí)，240nm 處的吸光度會(huì)隨 H?O?濃度的降低而同步下降，因此可通過監(jiān)測(cè) “240nm 吸光度下降速率” 間接反映催化 H?O?分解的酶活性。

（2）TPX 與 CAT 的協(xié)同測(cè)定邏輯

在樣品中，H?O?的分解由兩種酶共同催化：

試劑盒通過 “分組對(duì)照” 實(shí)現(xiàn)兩種酶活性的分別計(jì)算：

2. 關(guān)鍵試劑與操作步驟

（1）試劑準(zhǔn)備（試劑盒預(yù)裝，按需稀釋）

（2）操作步驟（紫外分光光度法）

3. 活性計(jì)算（以 “U/mL” 為單位）

（1）關(guān)鍵參數(shù)

（2）計(jì)算公式

注：活性單位定義為 “每分鐘催化 1μmol H?O?分解所需的酶量”，若需換算為 “U/mg 蛋白”，需在公式分母中加入 “樣品蛋白濃度（mg/mL）”。

4. 試劑盒優(yōu)勢(shì)