?;钚匝跽{(diào)制因子(ROMO1)酶聯(lián)免疫試劑盒
產(chǎn)品貨號(hào):DM-Cat6790
產(chǎn)品規(guī)格:48/96T
牛活性氧調(diào)制因子(ROMO1)酶聯(lián)免疫試劑盒是一種用于體外定量檢測(cè)牛相關(guān)生物樣本中 ROMO1 含量的工具,以下是其詳細(xì)介紹:
檢測(cè)原理:采用雙抗體夾心法 ELISA 技術(shù)。將捕獲抗體包被于酶標(biāo)板上,加入樣品及標(biāo)準(zhǔn)品,其中的 ROMO1 會(huì)被捕獲抗體結(jié)合。清洗后,加入生物素標(biāo)記的檢測(cè)抗體進(jìn)行孵育,形成 “捕獲抗體 - 抗原 - 檢測(cè)抗體” 免疫復(fù)合物。隨后加入鏈霉親和素偶聯(lián)的辣根過(guò)氧化物酶進(jìn)行孵育,再經(jīng)清洗后加入 TMB 顯色。若樣本中有待測(cè)物則顯藍(lán)色,加入終止液停止反應(yīng)。用酶標(biāo)儀在 450nm 處測(cè) OD 值,顏色深淺和樣品中的 ROMO1 含量呈正比,通過(guò)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線可計(jì)算出樣本中 ROMO1 的濃度。
試劑盒組成:通常包括預(yù)包被有抗牛 ROMO1 抗體的微孔板、ROMO1 標(biāo)準(zhǔn)品、生物素標(biāo)記的檢測(cè)抗體、鏈霉親和素偶聯(lián)的辣根過(guò)氧化物酶、洗滌緩沖液、TMB 底物液、終止液等。
樣本要求:血清、血漿、組織勻漿、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、細(xì)胞提取物等生物體液均可作為檢測(cè)樣本。
檢測(cè)范圍和靈敏度:試劑盒檢測(cè)范圍為 0.312-20ng/ml,靈敏度通常小于 0.119ng/ml。
操作步驟:準(zhǔn)備所有試劑、樣本和標(biāo)準(zhǔn)品。
每孔加入 100μl 標(biāo)準(zhǔn)品或樣本,37℃孵育 1 小時(shí)。
吸棄孔內(nèi)液體,加入 100μl 準(zhǔn)備好的檢測(cè)試劑 A,37℃孵育 1 小時(shí)。
吸棄液體并洗滌 3 次。
加入 100μl 準(zhǔn)備好的檢測(cè)試劑 B,37℃孵育 30 分鐘。
吸棄液體并洗滌 5 次。
加入 90μl 底物溶液,37℃孵育 10-20 分鐘。
加入 50μl 終止液,立即在 450nm 波長(zhǎng)處讀取 OD 值。
注意事項(xiàng):試劑盒的穩(wěn)定性由活性損失率決定,在適當(dāng)儲(chǔ)存條件下,保質(zhì)期內(nèi)損失率小于 5%。為減少額外影響,操作程序和實(shí)驗(yàn)室條件(如室溫、空氣濕度、孵育箱溫度等)應(yīng)嚴(yán)格控制,且強(qiáng)烈建議整個(gè)實(shí)驗(yàn)由同一操作人員完成。