凋亡的執(zhí)行者:Caspase蛋白酶家族的激活與檢測
在細(xì)胞程序性終止的信號通路中,Caspase蛋白酶家族扮演著不可替代的“劊子手”角色。它們是一類半胱氨酸-天冬氨酸特異性蛋白酶,以無活性的酶原形式存在于細(xì)胞中。當(dāng)接收到上游的凋亡信號(如來自線粒體途徑的細(xì)胞色素c或死亡受體途徑的信號復(fù)合物)后,起始Caspase(如Caspase-8, -9, -10)被激活,進(jìn)而切割并激活下游的執(zhí)行Caspase(如Caspase-3, -6, -7)。
活化的執(zhí)行Caspase具有廣泛的底物特異性,能夠切割多達(dá)數(shù)百種細(xì)胞內(nèi)的關(guān)鍵蛋白,從而導(dǎo)致細(xì)胞發(fā)生一系列不可逆的、特征性的生化與形態(tài)學(xué)改變。例如,Caspase-3可以切割核纖層蛋白,導(dǎo)致核膜破裂;切割DNA修復(fù)酶(如PARP),使其失活,加速DNA的片段化;還能切割細(xì)胞骨架蛋白,導(dǎo)致細(xì)胞皺縮、出泡。因此,Caspase的激活被認(rèn)為是細(xì)胞凋亡進(jìn)入不可逆執(zhí)行階段的中晚期標(biāo)志。
檢測Caspase的活性是確認(rèn)凋亡發(fā)生及其通路類型的關(guān)鍵手段。常用的方法包括:
亞科因生物(Abbkine) 為Caspase通路的研究提供了多層次的工具。例如,其Caspase-1活性分析試劑盒(比色法) 可用于研究細(xì)胞焦亡等炎癥相關(guān)通路。同時,Abbkine豐富的一抗、二抗及WB/IP/Co-IP工具箱,為通過免疫學(xué)方法研究Caspase的激活、相互作用及底物切割提供了完整支持。這些經(jīng)過驗證的產(chǎn)品,有助于研究者精確解析凋亡執(zhí)行階段的分子事件。