在生命科學(xué)研究中,蛋白質(zhì)是最直接執(zhí)行生物功能的分子,而重組蛋白表達(dá)技術(shù)的核心目標(biāo),就是在體外重建這一分子生成過程。所謂重組蛋白表達(dá),是指將目標(biāo)蛋白的編碼DNA引入宿主細(xì)胞,通過宿主自身的基因表達(dá)體系,將遺傳信息轉(zhuǎn)化為具有確定結(jié)構(gòu)和性質(zhì)的蛋白分子。理解DNA如何一步步變成可用蛋白,是正確認(rèn)識(shí)蛋白表達(dá)技術(shù)的基礎(chǔ)。從分子層面看,蛋白表達(dá)并不是單一事件,而是一個(gè)由遺傳調(diào)控驅(qū)動(dòng)、由多層生物機(jī)制協(xié)同完成的連續(xù)過程。其本質(zhì)是外源基因在宿主細(xì)胞中被“當(dāng)作自身基因”來轉(zhuǎn)錄和翻譯,并最終形成穩(wěn)定的蛋白結(jié)構(gòu)。一、基因表達(dá)的起點(diǎn):表達(dá)載體與啟動(dòng)子重組蛋白表達(dá)的前提,是目標(biāo)基因以合適的形式存在于宿主細(xì)胞中。這一角色由表達(dá)載體承擔(dān)。表達(dá)載體是一類經(jīng)過工程化設(shè)計(jì)的DNA分子,能夠攜帶目標(biāo)基因并在宿主細(xì)胞內(nèi)維持穩(wěn)定存在。除