乳酸脫氫酶（LDH）釋放法被廣泛用于評(píng)估細(xì)胞毒性。然而，將其結(jié)果簡單等同于“細(xì)胞死亡率”可能過于粗略。LDH釋放量強(qiáng)烈依賴于損傷的類型和檢測的時(shí)間點(diǎn)，它是一個(gè)動(dòng)態(tài)過程，而非靜態(tài) snapshot。

不同細(xì)胞死亡方式具有獨(dú)特的膜完整性喪失動(dòng)力學(xué)。典型的壞死性損傷（如高濃度過氧化氫處理）會(huì)迅速破壞細(xì)胞膜，導(dǎo)致LDH在短時(shí)間內(nèi)（幾小時(shí)內(nèi)）大量釋放。而凋亡過程在早期階段膜保持完整，LDH釋放很少；直到次級(jí)壞死階段，LDH才顯著釋放，這通常發(fā)生在凋亡誘導(dǎo)后的較晚時(shí)間（如24小時(shí)以后）。焦亡等其他程序性死亡方式也有其特定的時(shí)間窗口。因此，僅在單一時(shí)間點(diǎn)（如24小時(shí)）檢測LDH，可能錯(cuò)過早期壞死信號(hào)，或低估早期凋亡事件。

實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)必須包含動(dòng)態(tài)時(shí)間點(diǎn)監(jiān)測。對(duì)于作用機(jī)制未知的化合物，建議在處理后4、8、12、24小時(shí)等多個(gè)時(shí)間點(diǎn)取樣檢測。繪制LDH釋放的時(shí)間動(dòng)力學(xué)曲線，能更準(zhǔn)確地反映損傷模式和作用速度。

對(duì)照組的設(shè)置是數(shù)據(jù)解讀的生命線。

實(shí)驗(yàn)必須設(shè)立三個(gè)基礎(chǔ)對(duì)照：

1）背景對(duì)照（僅培養(yǎng)基），用于校正儀器本底；

2）自發(fā)釋放對(duì)照（細(xì)胞+培養(yǎng)基，無處理），反映正常細(xì)胞的基線釋放水平；

3）最大釋放對(duì)照（細(xì)胞+培養(yǎng)基+裂解液），代表100%細(xì)胞裂解釋放的LDH總量。專業(yè)的LDH檢測試劑盒會(huì)充分考慮這些需求。